Induzierbare Promotoren zur Markergen-Eliminierung mit Hilfe des Cre/lox-Rekombinationssystems

Die Herstellung genetisch veränderter Pflanzen erfordert in der Regel den Einsatz von Markergenen, welche die gezielte Selektion transformierter Zellen und deren Regeneration zu ganzen Pflanzen ermöglichen. Meist sind dies Antibiotikumresistenz-Markergene (ARMG), die allerdings nach erfolgreicher Regeneration für die mögliche praktische Nutzung der Pflanzen unerheblich sind.  

Im Rahmen eines Verbundprojektes des Bundesministeriums für Bildung und Forschung (BMBF) zum Thema‚ "Optimierung der biologischen Sicherheit transgener Pflanzen" wurde bei RLP AgroScience das Cre/lox Rekombinationssystem des Bakteriophagen P1 zur Eliminierung von ARMG an Reben erprobt. Hierzu wurde ein Vektorsystem entwickelt, das es ermöglicht nach Transformation und Regeneration das ARMG mittels induzierter Aktivität der Cre-Rekombinase wieder zu entfernen. Die Besonderheit besteht darin, daß die zusammen mit dem ARMG auf dem Vektor lokalisierte cre-Gen-Kassette, durch ein sequenzspezifisches Rekombinationsereignis, gesteuert durch einen von außen gegeben Reiz, ebenfalls wieder aus dem Genom entfernt wird (Autoexcision). Für diese Steuerung wurden und werden verschiedene induzierbare Promotoren getestet.